流式細胞儀
產品名稱
流式細胞儀
管理類別
第二類
型號規(guī)格
ZS-AD6、ZS-AE7S
結構及組成/主要組成成分
流式細胞儀由機械結構、光學系統(tǒng)、流體系統(tǒng)、電子學系統(tǒng)、軟件系統(tǒng)組成
適用范圍/預期用途
適用于人淋巴細胞亞群的鑒定和計數(shù)
（一）流式細胞儀的主要用途：
1、分析細胞表面標志。細胞表面的功能很復雜，是近年來分子細胞生物學研究的新域，細胞表面標志與免疫、癌變等都有著十分密切的關系。流式細胞儀的發(fā)明可以很好進行細胞表面標志的分析，起到非常重要的作用。
2、分析細胞內抗原物質�？乖悄艽碳C體產生抗體或致敏淋巴細胞，并與這些產物發(fā)生特異性反應的物質。通過流式細胞儀對于細胞內的抗原物質進行分析可以很好地了解機體的免疫功能等。
3、分析細胞受體。細胞受體主要是同脂溶性的小信號分子相作用，流式細胞儀通過對細胞受體的分析可以幫助調節(jié)更多的基因表達。
4、分析腫瘤細胞的DNA、RNA含量。流式細胞儀通過對腫瘤細胞的DNA、RNA分析，可以判斷出病變程度，對于診斷和治療是非常有利的。
5、分析免疫細胞的功能。免疫細胞俗稱白細胞，包括淋巴細胞、吞噬細胞等，流式細胞儀通過對于人體內的免疫細胞進行功能的分析，可以更好的判斷出各類細胞的功能，這對于幫助人體建立良好的免疫系統(tǒng)非常有幫助。
總結：流式細胞儀除了以上的主要用途之外，還被用于進行液體的活檢，包括ddPCR、NGS、CTC、還有ctDNA等。
（二）流式細胞儀的使用及注意事項
流式細胞儀在使用，甚至在使用過程中都要精心進行調試，以保證工作的可靠性和性。調試的項目主要是激光強度、液流速度和測量區(qū)的光路等。
(1) 激光強度調節(jié)：除調整反射鏡的角度以調整到所需波長的激光出光外，還要結合顯示屏上的光譜曲線使激光的強度輸出為大。
(2) 液流速度調節(jié)：可通過操作臺數(shù)字顯示監(jiān)督，調節(jié) 氣體壓力大小以獲得穩(wěn)定的液流速度。
(3) 測量區(qū)光路調節(jié)：這是調試工作的關鍵。需要保證在測量區(qū)的液流、激光束、90散射測量光電系統(tǒng)垂直正交，而且交點較小。一般可在用標準熒光微球等校準中完成。
流式細胞術中所測得的量是相對值，因此需要在使用或使用中對系統(tǒng)進行校準或標定，這樣才能通過相對測量獲得對的意義。因而FCM中的校準具有雙重功能：儀器的準直調整和定量標度。標準樣品應該穩(wěn)定，有形成份形狀應是大小比較一致球形，樣品分散性能良好，且經濟、容易獲得。常用標準熒光微球作為非生物學標準樣品，雞血紅細胞做為生物學標準樣品。
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微球用樹脂材料制作，或標有熒光素，或不標記熒光素。所用的雞血紅細胞標準樣品制作過程昭下：取3.8%枸櫞酸或肝素抗凝的雞血(抗凝劑：雞血=1：4)，經PBS清洗3次，再用5～10ml的1.0%戊二醛與清洗后的雞紅細胞混合，室溫下振蕩醛化24h，后經PBS再清洗，貯4℃冰箱中備用。需要指出的是因為未經熒光染色，所測光信號為雞血紅蛋白的自發(fā)熒光。
（三）流式細胞儀的操作和使用
(1) 打開電源，對系統(tǒng)進行預熱；
(2) 打開氣體閾，調節(jié) 壓力，獲得適宜的液流速度；開啟光源冷卻系統(tǒng)；
(3) 在樣品管中加入去離子水，沖洗液流的噴嘴系統(tǒng)；
(4) 利用校準標準樣品，調整儀器，使在激光功率、光電倍增管電壓、放大器電路增益調定的基礎上，0和90散射的熒光強度強，并要求變異系數(shù)為��；
(5) 選定流速、測量細胞數(shù)、測量參數(shù)等，在同樣的工作條件下測量樣品和對照樣品;同時選擇計算機屏上數(shù)據(jù)的顯示方式，從而能直觀掌握測量進程；
(6) 樣品測量完畢后，再用去離子水沖洗液流系統(tǒng)；
(7) 因為實驗數(shù)據(jù)已存入計算機硬盤(有的機器還備有光盤系統(tǒng)，存貯量更大)，因此可關閉氣體、測量裝置，而單獨使用計算機進行數(shù)據(jù)處理；
(8) 將所需結果打印出來。
1.4.3 操作和使用中的注意事項
(1) 光電倍增管要求穩(wěn)定的工作條件，暴露的較強的光線下以后，需要較長時間的“暗適應”以消除或降低部分暗電流本底才能工作；另外還要注意磁屏蔽；
(2) 光源不得在短時間內(一般要1h左右)關上又打開;使用光源必須預熱并注意冷卻系統(tǒng)工作是否正常；
(3) 液流系統(tǒng)必需隨時保持液流暢通，避免氣泡栓塞，所使用的鞘流液使用要經過過濾、消毒；注意根據(jù)測量對象的變換選用合適的濾片系統(tǒng)、放大器的類型等；
(4) 特別強度每次測量都需要對照組
更新時間：2024/9/10 12:38:44
標簽：
流式 流式細胞儀 細胞儀
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